得知西美濃四人眾倒戈的消息后，齋藤龍興久久不能平靜，西美濃四人眾效忠于齋藤家的時間實在是太長了，早在齋藤道三執掌美濃國政之時，西美濃四人眾就開始為齋藤家效力了。他完全沒有想到，在齋藤家危難之際，有著譜代家老格的西美濃四人眾竟然會叛離齋藤家。
而此時，齋藤家所面臨的更嚴重問題是，西美濃四人眾叛離以后，就意味著美濃通往近江、越前的通道被完全阻隔，齋藤家根本無法獲得來自六角家、淺井家、朝倉家的任何救援，就連齋藤家的本據稻葉山城也隨時都有可能遭到織田軍本隊的攻擊。
很快，齋藤龍興就意識到若是坐等織田軍逐一掃清稻葉山城外圍的所有城池兵砦，那么齋藤家的覆滅將必不可免。于是，齋藤龍興就親率一萬大軍欲趁織田軍立足未穩之際，與之決戰。
雙方大戰于稻葉山城以南的川手原，結果齋藤軍再次大敗而歸，被討取者達到了三千余人，就連麾下有力武將西美濃十八將中的八居國清、船木義久、松山正定、國枝正則、郡家光春、巖手道高、小柿長秀等人皆先后被織田軍討取，陣亡者尸體所腐爛發出的臭氣十里之外都能聞到。
齋藤龍興僅率馬廻眾十余人逃回了稻葉山城，在外援斷絕，糧草所剩無幾，軍中上下離心的窘境下，他甚至有了向織田家停戰求和的心思。
只不過因齋藤家不斷的丟城失地、損兵折將，織田信長在大好形勢下也不會輕易同意這個要求。
另一方面，隨著今川家放棄東三河的渥美郡、八名郡，并將軍勢撤入遠江后，井伊谷三人眾就意識到他們被今川家拋棄了。
近藤康用、菅沼忠久、鈴木重實三人為了保全自己的家名存續和所領安堵，迫于形式，就只能派遣使者與村上義清、里見義弘等上杉軍諸將進行接觸，打算臣從上杉家。
不僅是井伊谷三人眾有這個想法，就連被他們監視著的井伊家也有了這個想法。
雖然井伊家沒有緊隨遠江的國人領主們向今川家舉起反旗，但是這并不代表井伊家還打算盡忠于今川家。
作為當主的井伊直親在與井伊直平、井伊直成、井伊直緒、井伊直虎等家中一門親族眾商議一番后就做出了決斷——追隨上杉家。
正所謂這世上沒有不透風的墻，井伊直親的保密工作做的還是太差了一些，他所做出的決斷很快就被今川家安插在井伊家內部的耳目小野政次得知。
為了避免井伊家倒向上杉家，小野政次立馬將井伊直親內通上杉家的消息傳到了駿府館，讓今川家早做準備。
而如今的今川家可以說是風聲鶴唳，草木皆兵。今川氏真、壽桂尼等人在得到小野政次的匯報后，完全沒有任何猶豫，當即下令岡部元信、朝比奈泰朝、朝比奈泰長等身在遠江的家中重臣誅殺井伊直親，并做好攻滅井伊家的準備。
而此時的岡部元信、朝比奈泰朝、朝比奈泰長等人卻久攻引馬城不下，算是又一次嘗到了曾經頻繁驅使三河武士去攻城略地的惡果。
但岡部元信、朝比奈泰朝、朝比奈泰長等人根本就是分身乏術，完全沒有余力去兵臨井伊谷城下，只能改誅殺為暗殺的方式來進行。
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